Edible bait vaccine for rabbit haemorrhagic disease virus 2 (RHDV2) control in wild rabbits
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AcrónimoFIGHT 2
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Site do projeto
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Referência do projetoPTDC/CVT-CVT/29062/2017
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Entidade coordenadoraInstituto Nacional de Investigação Agrária e Veterinária, I.P. (INIAV, I.P.)
Investigador responsável
Maria Margarida Nunes da Rosa Dias Duarte
Entidades participantes
Instituto Nacional de Investigação Agrária e Veterinária, I.P. (INIAV, I.P.); FMV/ULisboa; IBET; Universidade de Évora
Programa de financiamento
FCT - Fundação para a Ciência e a Tecnologia e FEDER - Fundo Europeu de Desenvolvimento Regional
Operação de financiamento
Sistema de Apoio à Investigação Cientifica e Tecnológica
Sumário executivo
O objetivo do FIGHT-TWO é desenvolver uma ferramenta que permita ajudar a controlar a doença hemorrágica viral nas populações de coelho-bravo no todo o território nacional (continente e ilhas). A DHV causada pelo vírus de tipo 2, é atualmente uma preocupação mundial quer pelas implicações que a redução do coelho-bravo tem na cadeias tróficas que esta espécie alimenta e consequentemente, na preservação da biodiversidade, quer pelo impacto económico que esta doença tem no comércio de carne e peles de coelho doméstico.
Objetivos do projeto
O FIGHT-TWO pretende criar uma vacina oral segura (pathogen-free), para ser distribuída no campo, incorporada em ração adequada ao coelho-bravo. A administração desta vacina não depende da captura e manipulação dos animais, aspeto absolutamente crítico para o sucesso da vacinação de populações selvagens. A ingestão espontânea da vacina em forma de isco, tem o potencial de conseguir proteger uma ampla proporção das populações de coelho-bravo, um aspeto crucial para levar à interrupção das cadeias de transmissão do vírus no ambiente e consequentemente, potencializar ao controlo da infeção nas áreas afetadas.
Atividades
- Seleção de estirpes de RHDV2, amplificação e clonagem do gene da capside, e construção de plasmídeos recombinantes contendo o gene vp60 de estirpes de campo de RHDV2; produção baculovirus recombinante contendo o gene vp60;
- Produção e purificação de VLPs em células de inseto infetadas; avaliação estrutural e funcional das VLPs (eletrônica microscopia, hemaglutinação e western blotting);
- Produção de um soro imune contra RHDV2 em coelho doméstico usando uma vacina e desenvolvimento de i- ELISA para a deteção específica de anticorpos RHDV2;
- Avaliação da resistência das VLPs à temperatura, humidade e liofilização;
- Imunização por via oral de coelhos domésticos e silvestres em instalações laboratoriais controladas, com suspensões de VLP; challenge com vírus infecioso para avaliação da proteção imunológica conferida pela vacina;
- Testagem da imunidade induzida pela vacina em coelhos-bravos mantidos em cercado;
- Determinação da cinética da resposta imune à vacinação oral;
- Registo de patente e divulgação de resultados.
Resultados esperados
- Determinação das melhores condições de produção e purificação das VLPs em termos de rendimento e custos de produção;
- Obtenção de VLPs;
- Determinação da dose de VLPs (em µg) necessária para a imunização oral de coelhos domésticos e de coelhos-bravos;
- Determinação da capacidade imunogénica e protetora das VLPs 5)Implementação de ELISA indireta para deteção de anticorpos para RHDV2.
Financiamento total
239 980,13 €
Período do projeto
2018-10-01 - 2021-09-30
Regiao de intervenção
O projeto será desenvolvido maioritariamente na região de Lisboa e no Alentejo. Pretende-se contudo que a aplicação da vacina no futuro, venha a ser feita em zonas afetadas pela doença, qualquer que seja a sua localização no território nacional.
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Palavras-chave
RHDV2, vacina edível
